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小鼠腎小球組織提取物培養

小鼠腎小球組織提取物培養

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小鼠腎小球組織提取物培養 詳細資料

小鼠腎小球組織提取物【Kidney:Normal Mouse Glomerular Derivatives】
  小鼠腎小球組織提取物培養腎小球為血液過濾器,腎小球毛細血管壁構成過濾膜。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠腎小球組織中高質量的總RNA,PCR準備的*條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用於基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA製備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然後用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。        cDNA製備:純化後的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應體係進行逆轉錄,體係中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mgRNA68℃反應10min 後終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證產品的質量。        蛋白製備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)製備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋後用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。        潛在的應用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜

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小鼠腎小球組織提取物培養

Kidney:Normal Mouse Glomerular Derivatives

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注意事項:
1. 接收到小鼠腎小球組織提取物培養,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,並對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表麵,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。

培養步驟:
小鼠腎小球組織提取物培養對於貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於培養瓶中,置於37℃培養箱中消化1-2分鍾,然後在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養液後吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對於懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養液後吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基後,將剩餘細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

兔抗KM4A多克隆抗體 英文名:Anti-KM4A rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KM4C多克隆抗體 英文名:Anti-KM4C rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KCNA7多克隆抗體 英文名:Anti-KCNA7 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KCN1多克隆抗體 英文名:Anti-KCN1 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KCNG2多克隆抗體 英文名:Anti-KCNG2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KCNG3多克隆抗體 英文名:Anti-KCNG3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KCNG4多克隆抗體 英文名:Anti-KCNG4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KCNMB1多克隆抗體 英文名:Anti-KCNMB1 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KCNMB3多克隆抗體 英文名:Anti-KCNMB3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KCNMB4多克隆抗體 英文名:Anti-KCNMB4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KCNN4多克隆抗體 英文名:Anti-KCNN4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

兔抗KM5B多克隆抗體 英文名:Anti-KM5B rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光

小鼠腎小球組織提取物培養去內毒素質粒小量提取試劑盒 50T  盒

透析袋 扁寬45 截留分子量15000 0.5m/即用型  管

Oroxin A 木蝴蝶苷A 31567-75-6  20mg

D-Mannose D-甘露糖 3458-28-4  100mg

Lecithin from Soybean 卵磷脂(液體) 25g  瓶

核酸助沉劑 5×1ml  瓶

Nicotinic Acid 煙酸 59-67-6  20mg

(直徑)25mm水係濾器 0.22um  個

Acetylcorynoline 乙酰紫堇靈 18797-80-3  20mg

D-Methionine D-蛋氨酸 5g  瓶

Isocorynoxeine 異去氫鉤藤堿 51014-29-0  20mg 

 

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